张 玲，贾琦珍，陈根元
（塔里木大学动物科学学院／新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室，新疆 阿拉尔 ８４３３００）
摘要：探讨喜盐鸢尾（Ｉｒｉｓ ｈａｌｏｐｈｉｌａ）的化学成分，并建立起各萃取部分指纹图谱。采用植物化学成分系统预试法、薄层色谱分析技术及平面色谱图像定量法对喜盐鸢尾化学成分进行分析。结果显示，喜盐鸢尾含有生物碱、有机酸、酚类、鞣质、黄酮、蒽醌、皂甙、香豆素、挥发油及三萜类化合物，不含有强心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有９、７、９和６种化合物，经与标准品对照，乙酸乙酯相中含有鸢尾苷；各萃取相中相对含量最高的斑点依次为２、５、６和４。喜盐鸢尾化学成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。喜盐鸢尾含有丰富的活性成分，具有一定的药用价值。
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关键词 ：喜盐鸢尾（Ｉｒｉｓ ｈａｌｏｐｈｉｌａ）；化学成分；薄层色谱
中图分类号：Ｓ８１６ 文献标识码：Ａ 文章编号：０４３９－８１１４（２０１５）０7－1702－０5
ＤＯＩ： １０．１４０８８／ｊ．ｃｎｋｉ．ｉｓｓｎ０４３９－８１１４．２０１５．０7．０44
喜盐鸢尾（Ｉｒｉｓ ｈａｌｏｐｈｉｌａ）是鸢尾科（Ｉｒｉｄａｃｅａｅ）鸢尾属（Ｉｒｉｓ）多年生草本植物，主要分布于我国新疆、宁夏、甘肃等地，在新疆地区主要分布于天山北麓［１］。喜盐鸢尾具有清热、解毒、利尿、通淋、止血等功效，种子、根、茎均可入药，而且具有抗旱、抗寒和抗虫害特性强的特点［２］，其药用价值已受到中医药行业的关注。国内外学者已对鸢尾属植物化学成分进行了大量的研究，发现鸢尾中含有丰富的次生代谢产物，包括黄酮类、苯醌类、三萜类及二苯乙烯类化合物［３］。目前研究认为鸢尾甙和鸢尾苷元等异黄酮类化合物是其主要活性成分，具有抗炎、镇痛、抗过敏等作用［４］；近期研究发现其三萜类和苯醌类化合物具有良好的抗癌活性，二苯乙烯类化合物具有较好的自由基清除作用［５］。鸢尾属植物种类多，分布广，目前仅对其中少数植物进行了深入研究，喜盐鸢尾的研究报道较少，尚处于未开发状态，目前缺乏对其化学成分的系统研究。新疆喜盐鸢尾的资源丰富，深入研究喜盐鸢尾化学成分及其药理活性，对喜盐鸢尾的综合利用具有重要的理论价值。本试验通过植物化学成分系统预试、薄层色谱分析、平面色谱图像定量等技术，对喜盐鸢尾化学成分进行初步分析，为喜盐鸢尾活性成分的筛选和薄层指纹图谱的建立奠定基础。
１ 材料与方法
１．１ 材料、试剂及设备
喜盐鸢尾于２０１３年６月采集于阿克苏市拜城县，由塔里木大学动物科学学院草业科学学科组鉴定。样品经阴干、粉碎后保存备用。鸢尾甙标准品购自中国药品生物制品检定所（批号：１１１６３２－２０１２０１）；薄层层析硅胶ＧＦ２５４（天津光复精细化工研究所）；试验用水为去离子水。
ＫＱ－４００ＤＢ型医用数控超声清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；４００１型旋转蒸发仪（德国海道尔夫公司）；ＳＨＢ－Ⅲ型循环水式多用真空泵（河南郑州长城科工贸公司）；ＷＤ－９４０３Ｂ型紫外仪（北京六一仪器厂）；ＳＣＡＮＮＥＲ３型薄层扫描仪，定量毛细管（瑞士ＣＡＭＡＧ公司）；Ｄｉｒｅｃｔ－Ｑ３型超纯水系统（美国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）。
１．２ 喜盐鸢尾化学成分预试验
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参考文献［６］的方法，制备喜盐鸢尾石油醚提取液、乙醇提取液和水提取液，进行生物碱、黄酮、氨基酸、多酚、皂甙、香豆素、蒽醌、三萜类化合物、甾体、强心甙等化学成分的检测。教育期刊网 http://www.jyqkw.com
参考文献［７］的方法，对喜盐鸢尾氰甙和脂肪族硝基化合物进行专项检测。
１．３ 喜盐鸢尾化学成分薄层色谱分析
称取喜盐鸢尾干草粉１ ｋｇ，加入５ Ｌ乙醇，超声波辅助提取２ ｈ，过滤，收集提取液。如此重复３次，合并滤液，减压浓缩得到总浸膏。将总浸膏分散于２倍体积的超纯水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，即得喜盐鸢尾各极性段萃取部分。将各萃取部分用毛细管取样，点样于自制硅胶板，上行法展开，在距薄层板上缘１ ｃｍ处取出，挥干展开剂，先在紫外灯下观察，然后分别用碘蒸汽和体积分数为５％硫酸乙醇显色，记录各斑点颜色并计算Ｒｆ值。
１．４ 喜盐鸢尾化学成分相对含量测定
利用薄层扫描仪对各萃取相展开、显色效果最好的薄层板进行分析。采用连续扫描方式对显色斑点进行扫描，每个斑点扫描３次，取平均数作为峰面积进行计算。
Ｘｎ＝■×１００％
Ｘｎ表示编号为ｎ的斑点的相对百分含量，％；Ｓｎ表示编号为ｎ的斑点的峰面积；ｍ表示薄层色谱图中有ｍ个斑点。
２ 结果与分析
２．１ 喜盐鸢尾化学成分预试验结果
根据喜盐鸢尾化学成分系统预试验与单项预试验的检测结果可知，喜盐鸢尾含有生物碱、氨基酸及多肽、皂甙、酚类、鞣质、糖及多糖、黄酮及其苷类、有机酸、蒽醌类、三萜类化合物及甾体、香豆素、挥发油，不含有强心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。
２．２ 喜盐鸢尾总浸膏的制备及各极性溶剂萃取结果
１ ｋｇ喜盐鸢尾样品经超声提取后得总浸膏１０４．５５ ｇ，出膏率为１０．５％。总浸膏依次使用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分别得到４个萃取相浸膏１９．２２、１０．０６、２０．４４和６．３７ ｇ，萃取率分别为１８．４％、９．６％、１９．６％和６．１％。
２．３ 喜盐鸢尾各萃取相薄层色谱分析结果
喜盐鸢尾石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相各使用５种展开剂展开。由表１可知，石油醚／乙酸乙酯（６∶４，Ｖ／Ｖ）对石油醚相展开效果最佳，硫酸乙醇显色呈现９个斑点；由表２可知，氯仿／乙酸乙酯（６∶４，Ｖ／Ｖ）对氯仿相展开效果最佳，硫酸乙醇和碘蒸汽显色均呈现７个斑点；由表３可知，乙酸乙酯／乙醇（８∶２，Ｖ／Ｖ）对乙酸乙酯相展开效果最佳，３６５ ｎｍ波长紫外灯下显色呈现９个斑点，经与标准品比较，其中Ｒｆ值为０．５４的黄色斑点为鸢尾苷；由表４可知，氯仿／甲醇（２∶８，Ｖ／Ｖ）对正丁醇相展开效果最佳，硫酸乙醇显色呈现６个斑点。
２．４ 喜盐鸢尾各萃取相化学成分相对含量测定结果
选取喜盐鸢尾各萃取相展开效果最好的硅胶板，显色后应用薄层扫描仪进行扫描，通过峰面积计算各萃取相斑点的相对含量，测定结果见表５。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中相对含量最高的斑点依次为２、５、６和４。
３ 小结与讨论
目前，从鸢尾属植物中分离得到的化合物主要包括黄酮类及其糖苷、苯醌类、三萜类和二苯乙烯类化合物，其中黄酮类和三萜类化合物具有显著的生物活性。但关于新疆喜盐鸢尾化学成分的报道较少［８］，本试验研究发现喜盐鸢尾含有黄酮及其苷类、三萜类化合物及甾体，但未见其相关分离鉴定的报道，需进一步研究证实。
薄层色谱技术是一种简便、快速、微量、结果直观的分离方法，已广泛应用于植物化学成分定性分析和快速分离，兼备有纸色谱和柱色谱的优点。薄层色谱分析可以初步判定植物中化学成分的种类，也可应用于中药材及其制剂的真伪鉴别、质量控制和资源调查等，是目前建立中药指纹图谱的常用分析手段。同时，薄层色谱可提供直观的可见光或荧光图像，借助于薄层扫描仪可以得到不同层次的图谱和相应的积分数据，从而对化合物进行相对含量测定。本试验通过对喜盐鸢尾各萃取部分薄层色谱分析，其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分各至少含９、７、９、６种化合物；其中黄酮类化合物主要集中在乙酸乙酯部位，与其他鸢尾属植物的报道结果相吻合［９－１１］。与鸢尾苷标准品对照，发现其中第５个斑点与标准品显色的颜色和Ｒｆ完全一致，初步证明此萃取部分含有鸢尾苷，其他黄酮类成分有待进一步深入研究。通过薄层扫描仪测定，乙酸乙酯萃取相中鸢尾苷相对含量最高，表明喜盐鸢尾具有较高的药用价值。
喜盐鸢尾化学成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取相，其中石油醚萃取相中弱极性化合物种类较多、但相对含量较低；氯仿和正丁醇萃取相中强极性化合物的种类较多，而且相对含量也较高；乙酸乙酯萃取部分强极性化合物相对含量较高，所占比重最大。本试验对喜盐鸢尾化学成分进行了初步分析，为喜盐鸢尾化学成分的进一步研究及其各萃取相指纹图谱的建立提供依据。同时，还从乙酸乙酯萃取相中发现了鸢尾苷，为喜盐鸢尾的药用研究提供理论基础。
通过植物化学成分系统预试、薄层色谱分析及平面色谱图像定量，发现喜盐鸢尾含有生物碱、氨基酸及多肽、皂甙、酚类、鞣质、糖及多糖、黄酮及其苷类、有机酸、蒽醌类、三萜类化合物及甾体、香豆素、挥发油，不含有强心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有９、７、９和６种化合物，乙酸乙酯萃取相中含有鸢尾苷，其化学成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。
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参考文献：
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