李迎利1，刘贤侠2*，高树3，王汉魁2，王建梅2，柳建新2
（1.新疆石河子市兽医卫生检疫所，新疆石河子832000；2.石河子大学动物科技学院；3.新疆伊宁县畜牧兽医站）
摘要：本研究应用便携式兽用B超仪对患肝包虫的哈萨克绵羊进行了扫查，分析了包囊型和钙化型肝包虫典型病例的声像图，对部分患羊屠宰后的肝脏组织进行了剖解验证，并采样做常规切片进行了病理组织学观察。结果表明，哈萨克绵羊应用B超诊断这2种类型肝包虫具有很高的符合率，因此，应用B超诊断哈萨克绵羊患肝包虫具有可行性。
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关键词 ：哈萨克绵羊；肝包虫；B超；病理
棘球蚴又称包虫，是棘球绦虫的中绦期，寄生于牛、羊、猪、人及其他动物的肝、肺及其他器官中。棘球蚴的种类很多，但在我国细粒棘球蚴比较多见。细粒棘球蚴为世界性分布，但以牧区为多。在我国有20多个省、区有报道，尤其在西北诸省、区的牧区，对绵羊的危害较为严重[1]。细粒棘球蚴绦虫的终末宿主为犬科动物，它们将细粒棘球绦虫的虫卵和孕节随粪便排出体外，污染草料和饮水。牛、羊等中间宿主吞食虫卵后而受感染，进入消化道后，钻入肠壁经血流或淋巴散布到体内各处，以肝肺最多，如绵羊有70%在肝脏，25%在肺脏。其中，肝脏受感染后，其表面变得不光滑，有多个包囊与肝脏组织界限清楚的囊泡状突起，将其称为肝包虫病又称肝细粒棘球蚴病，是严重的人畜共患病[2]。因此，对该病的预防、诊断和治疗都非常重要。目前，对于肝包虫主要通过免疫学、影像学的方法诊断[3-6]，以及病理组织学[2]进行研究。应用影像学的方法可以活体进行诊断，免疫学与B超诊断相结合可以提高诊断的准确率[4]，本研究应用B超检查哈萨克绵羊，对诊断出典型肝包虫病例哈萨克绵羊的声像图进行了初步研究，并且对屠宰后哈萨克绵羊的病理变化进行了观察，以便为今后为绵羊肝包虫病的诊断、防治提供一定的基础和依据。
1材料与方法
1.1试验仪器
50S型TringaVet便携式兽用B超仪，配备3.5/5.0MHz变频扇扫凸阵探头（荷兰PiemedICAL公司生产）和Ni-MH12V充电电池、2215型NiCd/NiMHcharger各1个，另外有配套的50STringacommunicationsoftwareversion1.0图像处理软件ODTCOMM和双向红外传输接口及笔记本电脑。
1.2药品
AB-1型医用超声耦合剂（天津市南开区华科医疗器械厂生产），规格为250g。
1.3试验动物
一六五团的哈萨克绵羊和石河子市牛羊肉屠宰场的哈萨克绵羊。
1.4B超探查方法
绵羊站立保定，在绵羊右侧体表投影的肝脏区域（8~10肋间肩关节水平线下）进行剪毛，使肝脏体表投影区域皮肤显露。先用充电式电动剪毛剪推去粗长毛，然后将梳子间隔密度调小剪去剩余毛茬，必要时涂抹适量耦合剂后，用手术刀再把毛刮干净，最后在涂抹耦合剂后扫查，探头与皮肤保持充分密切接触，应注意避免人为造成探头活动及绵羊的骚扰，扫查到典型图像后冻结保存，记录断层图像的扫查存图时间。图像及时冻结后，进行相关指标的测量，保存在主机的声像图可用软件通过红外线传输至电脑保存。
1.5肝脏病理组织采样与常规切片制备
取肝脏包囊与正常结合区域的病变组织，将其切成1.5cm×1.5cm小块，并做好记号，放入10%的甲醛中固定24h。用自来水冲洗5~6h。脱水：在两缸丙酮溶液中浸泡各1h，两缸乙醇浸泡各1h，第3缸乙醇浸泡过夜。透明：在两缸二甲苯浸泡均不超过10min。浸蜡：温箱65℃，在3个蜡缸中浸蜡各1h，包埋，修蜡，切片。脱蜡：在三缸二甲苯中浸泡各5min，在不同浓度乙醇中浸泡，乙醇浓度由高到低按100%，95%，85%，75%各10s。染色：在苏木素中浸染10～15min后用水缓慢冲洗至水清，然后在盐酸酒精中浸染3~5s使组织微红后用水缓慢冲洗，使组织由红至篮，最后在1%伊红酒精中浸染5min至水清。脱色：按照乙醇浓度由低到高按75%，85%，95%，100%浸泡各10s，在有二甲苯的3个小缸中各浸泡5min，然后滴加树胶封片。
2结果与分析
2.1B超诊断典型声像图特点
哈萨克绵羊的正常肝脏见图1-A、1-B，肝脏回声均匀，呈现中等回声。包囊型肝包虫病羊呈现圆形或椭圆形的液性暗区，包虫囊壁与肝组织密度差别较大，具有很强的回声，囊壁与肝脏组织界限分明（图1-C、1-D），包囊内囊液充盈，囊壁完整，囊壁较为光滑，轮廓清晰，囊内充满水样囊液，B超扫查包囊声像图显示为液性暗区（图1-C、1-D、1-E、1-F），大小不等。
钙化型肝包虫病羊肝实质回声不均匀，肝脏区域B超扫查回声为光点或者光斑，数量随着病程不同体积大小和形状不同，多处多点出现回声增强，与正常肝脏组织回声反差很大，呈现出部分钙化或完全钙化（图1-G、1-H）。
2.2病理解剖学观察
屠宰后发现为包囊型肝脏，观察其表面，肝体积增大，肝脏表面不光滑，表面有多个包囊与肝脏组织界限清楚的囊泡状突起，囊泡颜色有白色、灰白色和浅黄色，形状多为圆形或类圆形，也有囊泡呈现无规则状（图2-B）。触摸包囊质地较软，壁薄。肝脏切面上有多个包囊，有无色、透明的包囊液流出，包囊内有很多数量为白色的细粒棘球蚴虫体，液体流出后呈现空洞（图2-C）。
屠宰后发现为钙化型肝脏，在肝表面有部分坏死灶（图2-D），已经钙化并且呈广泛性分布；切开肝脏后发现其内部切面上有多个干酪样坏死区域（图2-E、F），大小不等，与肝脏界限清晰。而健康绵羊的肝脏色泽暗红，被膜光滑，未见以上现象（图2-A）。
2.3组织切片观察
包囊型肝脏病理表现为包囊壁形成生发囊，内有棘球砂（图3-A）和包囊形成（图3-B），汇管区有肝包虫包囊（图3-C、D）。钙化型肝脏钙化灶已经无肝组织。
3讨论
操作中我们发现，由于哈萨克绵羊是粗毛羊，因此用充电便携式剪毛剪剪毛相对容易。便携式B超操作方便，效率高，容易探查出较清晰图像，扫查时，用力均匀并对肝区进行横向、纵向滑行或定点旋转扫查。在B超探查过程中，发现在探查区域有肋骨阻挡，尤其是哈萨克绵羊较瘦时肋骨显露明显，因此影响了对肝区的全面扫查，而我们所用的B超显示的是二维断面图像，因此导致少部分断面图像难以显示出来，可能影响诊断的结果。
在本研究中，我们对6只屠宰后的哈萨克绵羊肝脏解剖情况与B超检查的结果进行了比较验证，结果仅1例在肝叶边缘有一小钙化灶未能扫查到，其他肝脏区域正常，因此符合率很高，当肝脏的钙化灶很小或者个别包囊非常小未能检查出来，而肝脏的绝大多数区域都能检查清楚。
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参考文献
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[2]曹薇薇，田晶华.绵羊肝包虫的病理组织学观察[J].黑龙江畜牧兽医，2008（4）：77-78.
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